Fille de Pierre Monceau, professeur de mathématiques, et de Charlotte Lucie Moreno, Marguerite Moreno étudie en pension à Paris et en Bretagne, puis elle entre au Conservatoire de Paris dans la classe de Gustave Worms.
Engagée à la Comédie-Française en 1890, elle côtoie sur scène Charles Le Bargy, Mounet-Sully, Julia Bartet, Coquelin cadet, Paul Mounet. Elle est alors « la muse des symbolistes ».
Ses films notables sont : Les Misérables - Le Roman d'un tricheur - Regain - Ils étaient neuf célibataires.